Zigilatzea eta kutsadura arazoak MultiWell Cell Culture Plates-en

Ondo putzu anitzeko zelula-plakak kargatzea eta maneiatzea:

Zelularen kulturaren plakak gelaxka-eragiketak egitean Astepsia zorrotzaren printzipioa ere jarraitzen du. Eragiketa guztiak normalizatu eta zientifikoak izan behar dira, eta ez du eraginik izango zelulen hazkuntzan. Arazo ohikoena da zelulen uniformetasuna nola ziurtatu lagina gehitu ondoren eta zelulen hazkunde egoeran dagoen bitartekoak aldatzearen eragina gutxitu.

Galdetu:
96 eta 24 ontziko kulturako platerak edo Petri platerak oso solteak dira, hau da, aireztapen egokia da, baina bakteriak, moldea eta beste kutsatzaile batzuek ere irrist egingo dute?

Erantzuna:
Tapa oso soltea da, kultura erdi-irekikoari dagokiona, eta horren xedea da aireztatzea (egia esan, kulturaren plateretik kanpo CO2 egitea da kulturaren platerarekin erabat trukatzea eta kulturaren pH-a mantentzea eta kulturaren balioa mantentzea Ertaina).
Dena abantailak eta desabantailak ditu, eta horrek kutsaduraren aukera areagotzen du. Gainera, horrek platerean likidoa lurruntzea eragiten du, eta hori da drogen dosifikazio zehatza egiteko. Beraz, hurrengo bi neurri beharrezkoak dira: a. Inkubagailuko airea garbi egon behar da (argi ultramore arrunta, alkohol-garbiketa eta inkubagailua ireki eta itxi behar da ahalik eta gutxien) b. Inkubagailuaren hezetasuna beti% 100ean mantendu behar da (inkubagailuan kokatutako ur destilatu antzua duen konketa).
Petri plater bat bezala, goitik behera dagoen estalkia duen edukiontzia da, eta ez da kutsatuko. Batez ere estalkiaren ertzetik sortutako aire-fluxuaren presio negatiboa delako batez ere, hautsari lotuta dauden mikroorganismoak daude, eta aire-fluxuak eramandako hautsak ezin du presio negatiboa sortzen duen estalkiaren ertzetik pasatu. Aireztapen-efektua airearen difusioaren bidez baino ez da, eta ez da aire-fluxurik sortuko, beraz, bakarrik arnastu eta bakteriorik ez da barneratuko.

Galdetu:
24 putzu plaka erabiliz, badaude putzu batzuetan (banku ultra-garbian), eta badira zelulak beste putzu batzuetan kulturatzeko. Kezkatuta nago horrek kutsadura sortuko duela. Ez dakit zertan arreta jarri?

Erantzuna:
Eragiketa banku ultra-garbian normalizatuta badago, ondo egon beharko litzateke. Uste dut kulturaren plakaren estalkia oso erabilgarria egin dezakezula, saiatu behar diren zuloak soilik azaltzen eta estaltzeko beste zuloak estaltzen dituzula.
Kontuan hartu erabili aurretik eta erabili zulo guztien erabilera osoa; Zulo batzuk bakarrik erabili behar badituzu, alde bakarra erabil dezakezu eta gainerakoak estalki batekin estali. Lehenengo zulo egokia erabiltzen ohituta nago (komenigarria da laginak eskuineko eskuan gehitzea).

Eragiketa egitean, erabili beira diapositiba batzuk taularen alde bat igotzeko, ez ireki estalkia erabat, orokorrean ez da arazorik.
Zelulen banaketa eta irtenbide irregularrak

Galdetu:
Zelulak kulturaren plakan inokulatzen dira, eta zelulak zati periferikoan biltzen dira beti, nola aurre egin?

Erantzuna:
Galdetu dezaket nola nahasten diren zure zelulak? Kulturaren plaka hoditeria edo astindu al da? Azken hori bada, eta zirkulu batean astindu bada, litekeena da zelulak zati periferikora botatzea, indar zentrifugoaren ondorioz, erdian zelula gutxiago lortuz. Lau aste baino gehiago!
Hemen modu ona da: haziaren plaka landu aurretik, jarri kultura plaka inkubagailuan saturazio ordu batzuetan eta, ondoren, atera ezazu. Indarrak zelulak landatzerakoan argia izan behar du. Pixkanaka gehitzeak zelulen esekidura plateraren putzuetan isurtzea ahalbidetzen du eta kulturako zelulak funtsean berdindu egiten dira. Gogoratu astindu batekin inoiz astindu ez dadin, edo zure zelulek esan bezala esango dute.
Zenbat eta txikiagoa izan kulturaren plakaren zulo diametroa, orduan eta nabarmenagoa da fenomeno hau. Fenomeno hau ezinbestekoa da 24 eta 96 ondoko plateretarako, likidoak hormara atxikitzen duelako, kulturaren soluzioak ez du likido maila osatzen, baina periferia altua da, ispilu konkre bat bezala. Hala ere, ezin da bi orube mota hauek erabiltzen, ezin da kulturaren irtenbide nahikoa gehitu esku-hartze gehiagorako beharra dela eta, zelulak "ertz bilketa" agertuko direla kulturaren soluzioarekin batera. Zer adierazle behatu behar dituzun araberakoa da. MTT bada, immunohistokimikak zelulen geruzaren ondorioz emaitzetan eragina izango du.
Zelulak digeritzen direnean, arreta jarri berdintasunez zelula-zuloak ekiditeko, eta putzuan dagoen kulturaren irtenbide kopurua nahikoa izan behar da. Oro har, gehitu kultura irtenbide nahikoa inokulatzen denean eta aldatu irtenbidea behin-behinekoan gehitzean. Interbentzio-irtenbidean gehitutako kultura-irtenbide zenbatekoa inokulazio unean, kulturaren irtenbide kopuruaren berdina da, kasu honetan, "ertz multzoaren" fenomenoa hobetuko da, beraz, probatzea ere eman dezakezu.

Galdetu:
Egin nuena plaka eraketa esperimentua izan zen. Hobe da zelulak geruza uniforme batean zabaltzea. Zulo gehienak ondo daude birusa inokulatuta dagoenean, eta horietako batzuk ez dira uniformeak. Zelula taldean desberdintasun handiak daude. Galdetu nahi dizut zer metodo erabiltzen duzun gelaxkak gehitzean?

Erantzuna:
Kritikoa da zelulak zelula bakarreko esekidura egotea digestioaren ondoren! Ziurtatu putzu bakoitzeko zelula kopurua koherentea dela platera zatitzerakoan!
Jakina, prozesatzeko faktoreak ere badaude. Putzuen arteko paralelismoa ere oso garrantzitsua da. Adibidez, sendagaia gehitzean, nahastu sendagaia ondoren, putzu bakoitzaren kontzentrazioa koherentea dela ziurtatzeko!
Gainera, zelulak eta drogak gehitzean, proba taldea eta kontrol taldea gehitu behar dira, zelulen dentsitatearen eta drogen kontzentrazioaren aldea ekiditeko laginak gehitzeko sekuentziak eragindakoak!

Galdetu:
Kolpea jada uniformea ​​da, baina plankak, 6 zulo eta 24 zulo beti dira desorekatuak, eta erdialdean kontzentratuta daude. Gainera, nabaria da zenbaketa egiten dela eta egun bat edo bi igaro ondoren, zulo bakoitzaren dentsitatea desberdina da, detekzioan eragina izango duena. Ba al dago modu onik?

Erantzuna:
Pasteur pipeta erabiltzen baduzu, ez ezazu gehiegi zurrupatu, pipetako zelulak automatikoki hondoratuko direlako, askotan lehen zuloetako zelulen kopurua handia da, eta zelularen esekidura uniformea ​​da eta likidoa izango da Jarraitu S formako ibilbidea.
Pipeta bat erabiltzen baduzu, aholkuak prozesatu eta kendu behar dira zelulak kaltetu ez dadin, likidoa hartu ahal izateko putzu bati dagokiona. Zehaztasun handiagoa da zulo bat gehitzea punta batekin. Baina arreta ere jarri esekidura nahasten.

Talde paralelo bat konfiguratzeko, n nahikoa handia izan behar da (kalkulatu dezakezu).

Ez astindu xelebrearen ondoren, astinduak zelulak erdigunera agregatzea eragingo baitute. Hobe da behin plankatzea.

Zelula porota kulturako plaka Yongyue Medicalek beti hartu du kalitate kontrola enpresaren bizitza zela eta, enpresaren lehiakortasunaren etengabeko hobekuntza lortu zuen. Konpainiak beti legeak eta araudia obeditzeko espirituari atxikitzen zaio, autodiziplina zorrotza izateaz gain, arina izateaz arduratzen da eta erantzukizuna hartu eta merkatua kalitate bikaina eta zerbitzu bikaina izan daitezen. Bezeroen beharrak neurri handienean. . Bezeroekin irabazi-irabazi gure garapenerako helburua da. Yongyue Medikuak! Zure bikotekide fidagarria. Zurekin lankidetzan aritzeko prest gaude etorkizun hobea sortzeko.